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    COS-1細胞|COS-1細胞株 復蘇失敗原因分析

    發(fā)布時間:2017-02-21瀏覽:1116次

    COS-1細胞|COS-1細胞株 復蘇失敗原因分析

    產(chǎn)品名稱:COS-1細胞

    中文名稱:非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細胞

    種屬:非洲綠猴

    來源:腎;SV40轉(zhuǎn)化;雄性

    培養(yǎng)條件:DMEM+10%胎牛血清

    生長狀態(tài):貼壁生長

    2017年新學期,迎著朝陽,放飛夢想,久別重逢,相聚一堂,百尺竿頭,更進一步,學無止境,自立自強,為國爭光,慧穎細胞庫為答謝各位莘莘學子的厚愛,在新學期開學之際,將慧穎細胞庫1223株細胞特惠出售,更多活動詳情,請致電市場部!

     

    COS-1細胞|COS-1細胞株 復蘇失敗原因分析

    有的客戶在COS-1細胞復蘇傳代后發(fā)現(xiàn)貼壁細胞狀態(tài)不好,形態(tài)不佳,透光度亦不好,如果老師認為復蘇過程沒問題,那就核實下是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。

    有的老師認為首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。

    1、確認下凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,但我們因為這個問題就兩種肺癌細胞和一種肝癌細胞專門做過試驗,這個是絕大部分人細胞復不活的一個原因。太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。

     

    2、老師的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。

     

    3、老師的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。

     

    4、老師在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。

     

    5、老師的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。

     

    6、如果老師的細胞污染,你是否能很快看到。從這個角度講建議去除離心這步。

     

    7、老師的細胞在凍存前是否過密。

     

    還有,我們是不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。我們的細胞房不換拖鞋,非常臟,別人的細胞都污染,很多細胞都污染到絕種,但我們的只污染一次(兩年內(nèi)只有兩瓶),那次是因為當初有某高校組織學生參觀我們細胞庫給動過了,我們每次細胞擺放順序都是記住的。如果老師老懷疑孵箱污染,我們會認為老師的復蘇培養(yǎng)細胞經(jīng)驗還需要進一步熟練和積累經(jīng)驗。

    每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜。

    COS-1細胞|COS-1細胞株 復蘇失敗原因分析

    VERO C1008 (E6) 非洲綠猴腎細胞 非洲綠猴 腎;自發(fā)永生;雌性 DMEM 貼壁

    EBTr (NBL-4) 牛胚氣管細胞

    MDBK (NBL-1) 牛腎細胞 腎;自發(fā)永生;雄性 EMEM 貼壁

    MDCK(NBL-2) 狗腎細胞 腎;自發(fā)永生;雌性 EMEM 貼壁

    Super Tube 狗腎細胞

    UMNSAH/DF-1 雞胚成纖維細胞 胚胎;成纖維細胞;自發(fā)永生 DMEM 貼壁

    CRFK 貓腎細胞 腎;自發(fā)永生;雌性 1640 貼壁

    F81 貓腎細胞 腎;自發(fā)永生;雌性 1640 貼壁

    BHK-21 [C-13] 倉鼠腎成纖維細胞 倉鼠 腎;成纖維細胞;自發(fā)永生;雄性 EMEM 貼壁

    CHL 倉鼠肺細胞 中國倉鼠 肺;自發(fā)永生;雌性 DMEM 貼壁

    R 1610 倉鼠肺細胞 中國倉鼠

    V79 倉鼠肺細胞 中國倉鼠 肺;自發(fā)永生;雄性 DMEM 貼壁

    CHO/dhFr- 倉鼠卵巢細胞,二氫葉酸還原酶缺陷 中國倉鼠

    CHO-K1 倉鼠卵巢細胞亞株 中國倉鼠 卵巢;自發(fā)永生;雌性 F12K 貼壁

    CTLA4 Ig-24 中國倉鼠卵巢細胞 中國倉鼠

    Lec1 倉鼠卵巢細胞 中國倉鼠

    HMy2.CIR 人B淋巴母細胞 B細胞;EBV轉(zhuǎn)染;女性 IMDM 懸浮

    hFOB 1.19 人SV40轉(zhuǎn)染成骨細胞 成骨細胞;SV40轉(zhuǎn)化;條件永生;女性 DMEM/F12 貼壁

    HBL-100 人整合SV40基因的乳腺上皮細胞 乳腺;上皮細胞;SV40轉(zhuǎn)化;男性 1640 貼壁

    EA.hy926 人臍靜脈細胞融合細胞 臍靜脈;內(nèi)皮細胞;A549融合;女性 DMEM 貼壁

    WISH 人羊膜細胞 宮頸癌;女性 EMEM 貼壁

    RWPE-1 人正常前列腺上皮細胞 前列腺上皮;HPV18轉(zhuǎn)化;男性 F12K/1640 貼壁

    SV-HUC-1 人輸尿管上皮永生化細胞 輸尿管上皮;SV40轉(zhuǎn)化;男性 F12K 貼壁

    293 [HEK-293] 人胚腎細胞 胚腎;5型腺病毒轉(zhuǎn)化;女性 DMEM 貼壁

    293 Cells, low passage 人胚腎細胞

    293T 人胚腎細胞 胚腎;5型腺病毒及SV40轉(zhuǎn)化;女性 DMEM 貼壁

    293T/17 人胚腎細胞 胚腎;5型腺病毒及SV40轉(zhuǎn)化;女性 DMEM 貼壁

    2V6.11 人胚腎細胞

    AAV-293 人胚腎細胞 胚腎;5型腺病毒轉(zhuǎn)化;女性 DMEM 貼壁

    HFL1 人胚肺成纖維細胞 胚胎;肺;成纖維細胞;男性 F12K 貼壁

    MRC-5 人胚肺細胞 胚胎;肺;成纖維細胞;男性 DMEM 貼壁

    WI-38 人胚肺細胞 胚胎;肺;成纖維細胞;女性 DMEM 貼壁

    WPMY-1 人正常前列腺基質(zhì)永生化細胞

    Pt K1 (NBL-3) 袋鼠腎細胞 長鼻袋鼠

    Ana-1 小鼠巨噬細胞 小鼠 巨噬細胞;J2逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染;C57BL/6 1640 懸浮

    MC3T3-E1 Subclone 14 小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14 小鼠 前骨細胞;自發(fā)永生;C57BL/6 EMEM 貼壁

    A9 小鼠皮下結(jié)締組織細胞 小鼠

    LWnt-3A 小鼠皮下結(jié)締組織細胞 小鼠

    3T3-L1 小鼠胚胎成纖維細胞 小鼠 胚胎;成纖維;自發(fā)永生;雄性;Swiss albino DMEM 貼壁

    3T6-Swiss albino 小鼠胚胎成纖維細胞 小鼠 胚胎;成纖維;自發(fā)永生;雄性;Swiss albino DMEM 貼壁

    BALB/3T3 clone A31 小鼠胚胎成纖維細胞 小鼠 胚胎;成纖維;自發(fā)永生;雄性;BALB/c DMEM 貼壁

    BNL CL.2 小鼠胚胎肝細胞 小鼠 胚胎;肝;自發(fā)永生;BALB/c DMEM 貼壁

    C3H/10T1/2, Clone 8 小鼠胚胎成纖維細胞 小鼠 胚胎;成纖維;自發(fā)永生;C3H DMEM 貼壁

    NIH/3T3 小鼠胚胎細胞 小鼠 胚胎;自發(fā)永生;雄性;NIH Swiss DMEM 貼壁

    Psi2 DAP 小鼠胚胎成纖維細胞 小鼠

    MS1 小鼠胰島內(nèi)皮細胞 小鼠

    SV40 MES 13 小鼠腎小球系膜細胞 小鼠 腎小球系膜;SV40轉(zhuǎn)化 DMEM 貼壁

    OP9 小鼠骨髓基質(zhì)細胞 小鼠 骨髓基質(zhì);C57BL/6 x C3H 1640 貼壁

    C2C12 小鼠成肌細胞 小鼠 成肌細胞;自發(fā)永生,雌性;C3H DMEM 貼壁

    NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L] 小鼠成纖維細胞 小鼠 成纖維細胞;自發(fā)永生;雄性;C3H/An

    TM3 小鼠睪丸間質(zhì)細胞 小鼠 睪丸間質(zhì);自發(fā)永生;雄性 1640 貼壁

    B95-8 絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細胞 絨猴 白細胞;EBV轉(zhuǎn)化 1640 懸浮

    Mv.1.Lu(NBL-7) 貂肺上皮細胞 肺;自發(fā)永生 DMEM/EMEM 貼壁

    OK 負鼠腎細胞 負鼠

    NRK 大鼠腎細胞 大鼠 腎;自發(fā)永生;Osborne-Mendel DMEM 貼壁

    NRK-52E 大鼠腎細胞 大鼠 腎;自發(fā)永生;Osborne-Mendel DMEM 貼壁

    BRL 大鼠肝細胞 大鼠 肝;自發(fā)永生; Buffalo DMEM 貼壁

    BRL 3A 大鼠肝細胞 大鼠 肝;自發(fā)永生; Buffalo DMEM 貼壁

    NR8383 大鼠肺泡巨噬細胞 大鼠 巨噬細胞;自發(fā)永生;SD大鼠 F12K 貼壁+懸浮

    A7r5 大鼠胸大動脈平滑肌細胞 大鼠 大動脈平滑肌;自發(fā)永生;BDIX DMEM 貼壁

    H9c2(2-1) 大鼠心肌細胞 大鼠 心肌;自發(fā)永生;BDIX DMEM 貼壁

    L6 大鼠骨骼肌成肌細胞 大鼠 大腿;骨骼肌成肌細胞 DMEM 貼壁

    RSC96 大鼠雪旺細胞 大鼠 雪旺細胞;自發(fā)永生 DMEM 貼壁

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