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抗生素在細胞培養中應該怎么用?

發布時間:2020-04-28瀏覽:1967次
   細胞培養是指在體外模擬體內環境(無萄、適宜溫度、酸堿度和一定營養條件等),使之生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的-種方法。不論對于整個生物工程技術,還是其中之一的生物克隆技術來說,細胞培養都是-個*的過程,其本身就是細胞的大規模克隆。該技術可以由一一個細胞經過大量培養成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞,這是克隆技術*的環節。

  細胞培養起來感覺會很簡單,但是有時候也會出現各種不順的問題 ,例如:污染,生長緩慢,變形,死亡率過高…..,畢竟細胞是體外培養的,在培養的時候會受到各種外界因素的影響,培養基、血清、孵育溫度、C02濃度等,除此之外還有抗生素……

  一般來說細胞培養是不需要加抗生素,因為培養過程必須要無菌操作。如果實驗室污染嚴重,建議*打掃一下,擦拭消毒、熏蒸或者紫外照射殺菌。然后把細胞實驗涉及到的試劑都做下空培,包括使用的胰酶,胎牛血清等。如果實驗室無菌條件優異,細胞培養可以不加抗生素,因為抗生素的藥效水平和毒性水平非常接近。特別是用于細胞治療的培養。

  若當心細胞感染,可以適當添加一些抗生素預防,如果已經有污染,建議按照以下方案添加:

  1、常用的是青霉素、鏈霉素聯合抑制細菌,即所謂的“雙抗”,主要針對革蘭氏陽性菌、陰性菌;對于細菌的感染也可用慶大或卡那霉素;

  2、如果真菌污染嚴重,可用兩性霉素/制霉菌素控制;

  3、若為支原體污染, 可以用sciencell的支原體抑制劑。在培養基中加入新鮮的支原體抑制劑溶液,每3-4天更換一次。一兩周內的足以消除污染。可以有效的可以查殺各種原因感染的支原體。

  抗生素多加對細胞無益。加抗生素的主要問題是操作不慎造成的污染未必能及時發現,造成后期較大的損失。

  青鏈霉素是廣譜抑菌劑,對革蘭氏陰性和陽性細菌有抗菌性,青霉素影響細菌細胞壁合成的終末步驟,在轉肽反應步驟一直多肽鏈的延伸;鏈霉素與核糖體的30S亞基單位結合,阻斷細菌蛋白質的組成。比較常用 。

  一旦細胞污染,處理辦法扔掉,查找原因,全面預防。如果細胞是經過大量工作或高價才得到的,扔掉實在可惜,可以針對污染源加抗生素。也可以不加抗生素進行單克隆有限稀釋至96孔板,再克隆化。

  但是污染帶來的實驗影響和損失不可估量,主要的是平常都要做好細胞房的管理和消毒工作。防止污染的發生。

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