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    BDNF測(cè)定使用ELISA試劑盒時(shí)標(biāo)本要求和洗板方法

    發(fā)布時(shí)間:2012-07-11瀏覽:2432次

    洗板方法
    手工洗板方法:甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。

    自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。

    標(biāo)本要求
     1.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
     2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
    需要而未提供的試劑和器材
     37℃恒溫箱。
     標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
     精密移液器及一次性吸頭
     蒸餾水,
     一次性試管
     吸水紙
    注意事項(xiàng)
     從2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
     各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。
     建議所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣本都做雙份檢測(cè)。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高,請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再按說(shuō)明書操作進(jìn)行測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
    嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
    為避免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。
    不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
    底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。
     

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