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    論壇中討論比較激烈的Elisa試劑盒幾個(gè)問題

    發(fā)布時(shí)間:2012-09-24瀏覽:2674次
    mybiofield: 您好,我現(xiàn)在準(zhǔn)備用ELISA法夾心法測(cè)人血清中ELISA試劑盒IL-1,IL-6,CRP,TNF,但是對(duì)具體操作上海ELISA試劑盒還有些很低級(jí)的問題,請(qǐng)問:    
    1.預(yù)實(shí)驗(yàn)時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度怎樣確定?梯度做幾個(gè),需要做空白孔嗎?豬ELISA試劑盒復(fù)孔要做嗎?
    2.樣本的梯度作白介素ELISA試劑盒幾個(gè)?稀釋倍數(shù)確定的依據(jù)時(shí)什么ELISA試劑盒價(jià)格?
    3.我測(cè)的樣本中TNF量很低,禽ELISA試劑盒國(guó)外有人用高敏試劑盒,國(guó)內(nèi)有用化學(xué)發(fā)光法,您知道有沒有更經(jīng)濟(jì)的方法?
    生e網(wǎng),多謝!
    請(qǐng)問mybiofield:
    雙抗夾心法中,zui后TMB用硫酸終止,測(cè)量OD450的時(shí)候是用單波長(zhǎng)450nm還是雙波長(zhǎng)測(cè)量?如果是后者,參考波長(zhǎng)是哪個(gè)?630nm可以嗎?
    我陰性陽(yáng)性血清都是從1:50開始被比稀釋,到1:25600,陽(yáng)性O(shè)D值都在1.0以上,1.7以下。陰性值在0.3以下。0.2的不多,多數(shù)在0.1及其以下。我的血清效價(jià)這么高,但是怎么OD值到不了別人說的2或者3呢?
    mybiofield:
    謝謝你的幫助
    我是用間接ELISA檢測(cè)人補(bǔ)體C1q 抗體,還想請(qǐng)教mybiofield
    我的預(yù)實(shí)驗(yàn)是這樣的
    1、用pH9.6,0.05M的碳酸鹽稀釋抗原C1q,10ug/mL,5ug/mL,2.5ug/mL
    100uL/孔,4度過夜,PBST洗板三次
    2、用10%的小牛血清(pH7.2的PBS),200uL/孔,37度3h,PBST洗板三次
    3、加入陰陽(yáng)性血清100uL/孔,37度,2h,PBST洗板五次
    4、 PBST(含1%的小牛血清)稀釋酶標(biāo)記的羊抗人IgG1:10000,1:20000, 1:40000,100uL/孔 ,37度,半小時(shí)
    結(jié)果:   10ug/mL  5ug/mL  2.5ug/mL
    1:10000 +   0.983  0.740  0.714
    1:10000 -   0.577  0.676  0.576
    1:10000空白 0.180  0.134  0.097
    1:20000 +   0.508  0.506  0.367
    1:20000 -   0.333  0.385  0.313
    1:20000空白 0.085  0.094  0.078
    1:40000 +   0.331  0.379  0.229
    1:40000 -   0.233  0.303  0.261
    1:40000空白0.061  0.068  0.06
    請(qǐng)mybiofield幫忙分析,謝謝。用Elisa試劑盒的時(shí)候我該怎么選擇包被濃度,酶的濃度以及封閉的條件如何,多謝
    mybiofield :你好
    我們現(xiàn)在的實(shí)驗(yàn)是從肝組織勻漿中檢測(cè)TNF-a,但好幾次預(yù)試的結(jié)果,TNF-a的含量都超過了Elisa試劑盒的上限,我們的Elisa試劑盒是從晶美買的,肝勻漿的濃度從 1:10 1:20 1:40 到1:100 1:200都沒有很大的區(qū)別,勻漿用的是PBS,勻漿方法用的是先用勻漿器研碎,再在-86度冰箱反復(fù)凍融3次,其余均嚴(yán)格按Elisa試劑盒內(nèi)說明操作,請(qǐng)問這可能是哪一步出了問題?或是肝勻漿本身上海ELISA試劑盒也會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果?如何才能解決?ELISA試劑盒價(jià)格謝謝了,在線等!
    mybiofield :你好
    能不能說一點(diǎn)點(diǎn)關(guān)于Elisa試劑盒保護(hù)液的配方豬ELISA試劑盒
    gsljz wrote:
    請(qǐng)問樓主:禽ELISA試劑盒我想自己做某個(gè)抗原成份的elisa試劑,ELISA試劑盒即自己包被酶標(biāo)板,沒有抗原做標(biāo)準(zhǔn)品怎么辦?白介素ELISA試劑盒是否需要去買?     
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