無外泌體血清 梅約診所如何開展exosome研究

exosome如今是個熱門的話題。這種直徑約為30-150 nm的小囊泡天然存在于所有體液中，包括血液、唾液、尿液和母乳，且其蛋白、RNA和脂肪成分特異，因此，exosome有望在多種疾病的早期診斷中發(fā)揮作用。如何開展exosome的研究？我想這是大家都感興趣的。那就讓我們來看看的梅約診所（Mayo Clinic）是怎樣做的。

exosome如今是個熱門的話題。這種直徑約為30-150 nm的小囊泡天然存在于所有體液中，包括血液、唾液、尿液和母乳，且其蛋白、RNA和脂肪成分特異，因此，exosome有望在多種疾病的早期診斷中發(fā)揮作用。如何開展exosome的研究？我想這是大家都感興趣的。那就讓我們來看看的梅約診所（Mayo Clinic）是怎樣做的。

梅約診所的Gregory Gores博士主要開展肝臟疾病的基礎研究。他所感興趣的領域之一是脂毒性及其在非酒精性脂肪性肝病發(fā)展中的作用。研究小組提出假說，認為脂毒性誘導肝臟細胞釋放囊泡（exosome和小囊泡）。他們推測，這些細胞外囊泡參與了免疫細胞的招募和激活，導致肝臟炎癥。

Gores博士的小組需要測定樣品中細胞外囊泡的大小分布和數量。之前，他們使用掃描電鏡來觀察和測定顆粒大小，并通過吸光度來測定蛋白含量，但發(fā)現這種方法不大準確。于是，他們選擇了NanoSight的納米顆粒追蹤分析（NTA）技術。有了這一技術，他們能夠在分離后立即分析囊泡，并在同一天內將濃度的囊泡用于后續(xù)實驗。

在實驗過程中，他們使用的是NS300納米顆粒分析儀。此款儀器能夠測定大小在10-2000 nm的懸浮顆粒，滿足廣泛的應用需求，包括蛋白聚集、exosome和囊泡研究、藥物運輸，也特別適合以熒光量子點標記的顆粒分析。

這個款的NanoSight儀器提供了多方面的分析。它配備一個能同時放置六塊熒光濾片的機動濾光輪，并具有流變特征，可測定在0-5 cP范圍內的粘度。它還配有高靈敏度的CMOS攝像頭、溫度控制，以及激光塊的選擇。它外形小巧，占地僅為40 cm長和25 cm寬，適合那些空間有限的實驗室。

在談及NS300納米顆粒分析儀時，研究員Petra Hirsova博士談道：“能夠實時地看到、計數并測定顆粒的大小，這相對于我們使用過的其他技術已經是很大的優(yōu)勢。與掃描電鏡相比，NTA制備樣品和獲得結果要更輕松、更快速。與測定囊泡總蛋白的技術相比，NTA帶來了細胞外囊泡的更評估。”

NanoSight是一家私營公司，總部設在英國。它已在范圍內出售了500多臺儀器，其客戶包括葛蘭素史克、諾華、輝瑞、寶潔、聯合利華等，以及zui的大學和研究所。截至目前，NanoSight的技術已被900多篇第三方文獻引用。在今年9月，NanoSight被思百吉集團所收購。

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