769-P細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)

1、冷凍管應(yīng)如何解凍？

取出冷凍管后， 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍， 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)， 必須注意安全， 預(yù)防冷凍管之爆裂。

2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí)， 是否應(yīng)馬上去除DMSO？

除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細(xì)胞外， 絕大部分細(xì)胞株（包括懸浮性細(xì)胞）， 在解凍之后， 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中， 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。

3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？

不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基， 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基， 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)， 造成細(xì)胞無法存活。

4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？

不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源， 所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清， 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。

5、何謂FBS, FCS, CS, HS ?

FBS (fetal bovine serum) 和FCS (fetal calf serum) 是相同的意思， 兩者都是指胎牛血清， FCS 乃錯(cuò)誤的使用字眼， 請不要再使用。CS (calf serum) 則是指小牛血清。HS (horseserum) 則是指馬血清。

6、培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)應(yīng)使用5 % 或10% CO2？或根本沒有影響？

一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+ 作為pH 的緩沖系統(tǒng)， 而培養(yǎng)基中NaHCO3 的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用的CO2 濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3 含量為每公升3.7 g 時(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用10 % CO2；當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3 為每公升1.5 g 時(shí)， 則應(yīng)使用5 % CO2 培養(yǎng)細(xì)胞。

7、何時(shí)須更換培養(yǎng)基？

視細(xì)胞生長密度而定， 或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。

8、培養(yǎng)基中是否須添加抗生素？

除于特殊篩選系統(tǒng)中外， 一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下， 培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。

9、附著性細(xì)胞繼代時(shí)所使用之trypsin-EDTA 濃度？應(yīng)如何處理？

一般使用之trypsin-EDTA 濃度為0.05% trypsin-0.53mMEDTA.4 Na。*次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中， 保存于–20 ℃，避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin 之活性降低， 并可減少污染之機(jī)會(huì)。

10、懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理？

一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中， 稀釋細(xì)胞濃度即可， 若培養(yǎng)液太多時(shí)， 可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高， 直到無法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶， 加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度， 重復(fù)前述步驟即可。

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RKO人結(jié)腸腺癌細(xì)胞

RKO-AS45-1人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞

RKO-E6人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞

RL95-2人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞

RM-1小鼠前列腺癌細(xì)胞

RSC96大鼠雪旺細(xì)胞

RT4人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤細(xì)胞

RWPE-1人正常前列腺上皮細(xì)胞

rwpe2人前列腺正常細(xì)胞

S-180小鼠腹水瘤細(xì)胞

Saos-2人成骨肉瘤細(xì)胞

ScaBER人膀胱鱗癌

SCC-25 人舌癌細(xì)胞

SF-268人神經(jīng)癌細(xì)胞

SF-295人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞

SGC7901人胃腺癌細(xì)胞

SHG-44腦膠質(zhì)瘤

SH-SY5Y人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

SHZ-88大鼠乳腺癌細(xì)胞

SiHa人子宮頸鱗癌細(xì)胞

SK-BR-3人乳腺癌細(xì)胞

SK-HEP-1人肝癌細(xì)胞

SK-MES人肺鱗癌細(xì)胞

SK-MES-1人肺鱗癌細(xì)胞

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SK-N-BE(2)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

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